Napredni genski elektroporator

GP-3000 – genski elektroporator

Genski elektroporator GP-3000 sastoji se od glavne jedinice, kivete za gensku elektroporaciju i namjenskih spojnih kabela. Koristi elektroporaciju za unos DNA u kompetentne stanice, biljne i životinjske stanice te stanice kvasca. U usporedbi s drugim metodama transformacije nudi visoku ponovljivost, visoku učinkovitost, jednostavno rukovanje i precizno upravljanje, a budući da je elektroporacija fizički, a ne kemijski ili virusni proces, uzrokuje zanemarivu gensku toksičnost. U usporedbi sa SCIENTZ-2CS, GP-3000 uz eksponencijalni pad dodaje i mod pravokutnog impulsa, finije podešavanje kapaciteta niskog i visokog napona te konfigurabilno višeimpulsno izbijanje za zahtjevnije protokole.

Načelo rada

Elektroporacija (stanična elektroporacija) unosi egzogene makromolekule – DNA, RNA, siRNA i proteine, kao i male molekule – u stanice. Pod utjecajem jakog, kratkotrajnog električnog polja stanična membrana postaje propusna, omogućavajući nabijenim egzogenim tvarima da je prijeđu na način sličan elektroforezi. Budući da fosfolipidni dvosloj ima visok otpor, većinu primijenjenog napona nosi membrana, dok u citoplazmu dopire samo minimalna struja, a napon uz jezgrinu membranu vrlo je nizak, što citotoksičnost i gensku toksičnost održava na zanemarivoj razini. Kao fizička metoda, elektroporacija je uglavnom neovisna o molekularnim svojstvima površine stanice, pa se može primijeniti na gotovo svaku vrstu stanica, a rezultate je lako kvantificirati.

Značajke

• Visoka učinkovitost – kratko vrijeme transformacije, visoka stopa konverzije, izvrsna ponovljivost
• Inteligentna pohrana – eksperimentalni parametri mogu se spremiti i lako učitati
• Precizno upravljanje – pražnjenje impulsa upravljano mikroprocesorom
• Estetski, integrirani dizajn – intuitivan zaslon osjetljiv na dodir, jednostavno rukovanje

Tehnički parametri

• Vrsta impulsa: eksponencijalni pad i pravokutni impuls
• Izlaz visokog napona: 401–3000 V
• Izlaz niskog napona: 50–400 V
• Napajanje: 100–240 VAC, 50/60 Hz, 100 W
• Broj uzastopnih izbijanja: 1–9
• Kapacitet niskog napona: 25–1575 µF, korak 1 µF (preporučen korak 25 µF)
• Kapacitet visokog napona: 10–60 µF, korak 1 µF (preporučeno 10/25/35/50/60 µF)
• Paralelni otpor: 50–1650 Ω, korak 50 Ω
• Vrijeme izbijanja i intervala: 0,1–999 ms, korak 0,1 ms
• Upravljački sustav: mikroračunalno upravljanje, podesiva RC vremenska konstanta
• Dimenzije glavne jedinice: 30 × 20 × 20 cm; neto masa 4,5 kg

Standardna konfiguracija sustava

Glavna jedinica, kiveta za gensku elektroporaciju, namjenski spojni kabeli.

Okvirni parametri elektroporacije prema organizmu

Napomena: parametri se razlikuju između laboratorija i navedeni su samo informativno.

Primjene genskog elektroporatora GP-3000

• Elektroporacija bakterija, kvasaca i drugih mikroorganizama
• Transfekcija stanica sisavaca, biljnih tkiva i protoplasta
• Hibridizacija stanica i fuzija gena
• Unos markerskih gena u svrhu obilježavanja i indikacije
• Unos lijekova, proteina, protutijela i drugih molekula za proučavanje strukture i funkcije stanice

Tipična područja primjene uključuju prehrambenu industriju, poljoprivredne znanosti, veterinarska istraživanja te bioinženjerstvo.